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全内反射荧光显微镜(TIRFM)

全内反射荧光显微镜(TIRFM)

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TIRFM基于在光入射到两种不同折射率的光学介质界面时产生的倏逝波。它使用一个配备有样品照明系统的普通荧光显微镜,如图所示。附着在玻璃板表面的样品通过荧光分子(荧光染料)标记。玻璃表面的背面以小于全内反射临界角的角度照射光,使得只有在倏逝波的小扩展距离(<光波长)内的荧光染料被照亮以诱导荧光,该荧光由物镜成像。样品可以浸没在折射率小于玻璃的液体中,通过浸没,放大倍数可以增加到×100,可以在水溶液中原位研究生物分子。TIRFM在图像获取速度方面优于LSCM。


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